BIO-RAD CFX Maestro(定量PCR數據處理大師)v4.1官方版

BIO-RAD CFX Maestro是一個化繁為簡的BIO-RAD定量PCR數據處理大師，軟件能夠操作所有CFX係列實時定量PCR儀，進行實驗設置、儀器操作和數據分析，軟件全麵整合了數據采集、統計學分析（t- 檢驗、方差分析）和用於出版發表的結果導出功能，為實時定量 PCR 儀實驗提供了一站式的解決方案。

【軟件應用】

　　背景簡介：

　　肌萎縮性脊髓側索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS），俗稱“漸凍人”，是一種運動神經元疾病，病人表現出因上運動神經元和下運動神經元變性所致的肌無力、肌萎縮等症狀。為研究其是否存在細胞自噬的病理，研究者將ALS患者和其他非ALS類型包括包涵體肌炎（inclusion body myositis，IBM，一種慢性炎症性肌病）樣本等進行比較。觀察ALS病理的一種已知標誌物磷酸化TAR DNA結合蛋白43（pTDP-43）以及調節細胞自噬的P62蛋白的特異性表達情況。除用到免疫組化、免疫熒光的方法外，研究人員也對這兩種蛋白對應的基因TARDBP 和SQSTM1 進行了qPCR實驗分析比較，以下是具體的過程。

　　樣本設置：

　　ALS樣本組——ALS1-ALS5共5個生物學重複；

　　IBM樣本組——IBM1-IBM3共3個生物學重複；

　　陰性對照組——MSC1-MSC3共3個輕微神經源性肌萎縮樣本生物學重複；

　　空白對照——1個無模板對照

　　基因設置：

　　2個目的基因——TARDBP，SQSTM1；

　　2個參考基因——GAPDH，RPS18；

　　所用到的染料法引物對均來自於Bio-Rad提供的PrimePCR Assay。

　　板麵布局：

　　12個樣本×4個基因，1個96孔板做2個重複，共做2個96孔板（即2個批次實驗，各4個技術學重複）。

　　數據分析方法：

　　將TARDBP 和SQSTM1 表達用兩個參考基因（GAPDH，RPS18）進行均一化，兩組患者分別與對照組進行相對均一化基因表達比較，顯著性檢驗采用非配對t 檢驗。